Тест-система «Биочип-SER» для флюоресцентного иммуноцитохимического исследования экспрессии антигена Ep-CAM на материале выпотных жидкостей и смывов

Цель исследования — оценить возможности тест-системы «Биочип-SER» для анализа экспрессии антигена Ep-CAM методом флюоресцентной иммуноцитохимии.

Материалы и методы. Проведено 64 цитологических, 64 стандартных иммуноцитохимических (СИЦХ) и 64 флюоресцентных иммуноцитохимических (ФИЦХ) исследования с использованием тест-системы «Биочип-SER» 59 пациентам (45 выпотов и 19 смывов с органов брюшной полости). Работу выполняли в 4 этапа: 1-й этап — цитологическое исследование; 2-й этап — СИЦХ; 3-й этап — ФИЦХ на тест-системе «Биочип-SER»; 4-й этап — контрольное цитологическое исследование с использованием тест-системы «Биочип-SER». СИЦХ проводили с моноклональным антителом (МКАТ) к эпителиальному антигену Ep-CAM, ФИЦХ — с МКАТ к эпителиальному антигену Ep-CAM, конъюгированному с флюорохромом Alexa Flour 488.

Результаты. ФИЦХ-исследование, выполненное с использованием тест-системы «Биочип-SER», показало 100% диагностическую чувствительность, специфичность теста составила 89%.

Заключение. ФИЦХ-исследование, проведенное с МКАТ к антигену Ep-CAM, конъюгированному с Alexa Flour 488, на тест-системе «Биочип-SER» является надежным методом диагностики опухолевого процесса в выпотных жидкостях, что позволяет рекомендовать его для широкого применения как в специализированных учреждениях, так и в первичном диагностическом звене.

1. Семенов Д.А., Целуйко С.С. Гистофизиология плев­ральной полости и плеврального выпота. Дальневосточный медицинский журнал 2012; 2: 140–144.
2. Долгов В.В., Шабалова И.П., Миронова И.И., Джан­гирова Т.В., Коротаев А.Л. Выпотные жидкости. Лабораторное исследование. М: Триада; 2006.
3. Глузман Д.Ф., Скляренко Л.M., Надгорная В.А., Кря­чок И.А. Диагностическая иммуноцитохимия опу­хо­лей. Киев: Морион; 2003.
4. Shidham V.B., Atkinson B.F. Cytopathologic diagnosis of serous fluids. Elsevier Saunders; 2007.
5. Савостикова М.В., Фурминская Е.Ю., Федосе­ева Е.С., Кудайбергенова А.Г. Флуоресцентное иммуно­цитохимическое исследование выпотов и смывов с серозных полостей при интраоперационной диагностике. Клиническая лабораторная диагностика 2017; 62(12): 742–745.
6. Лазарев А.Ф., Григорук О.Г., Базулина Л.М., Му­за­левский П.Н., Кравцов В.Ю. Мезотелиома плевры: этиология, заболеваемость, диагностика, лечение, выжи­ва­емость. Российский онкологический журнал 2013; 5: 15–20.
7. Davidson B. Malignant nonhematological effusion characterization by flow cytometry. Acta Cytol 2016; 60(4): 365–371, https://doi.org/10.1159/000447687.
8. Болгова Л.С., Мариненко С.В. Современные воз­мож­ности дифференциальной цитологической диагнос­тики пролиферирующего мезотелия, мезотелиомы и мета­стазов рака (обзор литературы и результаты соб­ственных исследований). Клиническая онкология 2015; 4(20).
9. Gabris S., Kern L. Two color immunostaining of pleural effusions with Ber-EP4 and CK5/6. Cytopathology 2004; 15(Suppl 2): 14.
10. Comin C.E., Saieva C., Messerini L. H-caldesmon, calretinin, estrogen receptor, and Ber-EP4: a useful combination of immunohistochemical markers for differentiating epithelioid peritoneal mesothelioma from serous papillary carcinoma of the ovary. Am J Surg Pathol 2007; 31(8): 1139–1148, https://doi.org/10.1097/pas.0b013e318033e7a8.
11. Schnell U., Cirulli V., Giepmans B.N. EpCAM: structure and function in health and disease. Biochim Biophys Acta 2013; 1828(8): 1989–2001, https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2013.04.018.
12. Latza U., Niedobitek G., Schwarting R., Nekarda H., Stein H. Ber-EP4: new monoclonal antibody which distinguishes epithelia from mesothelial. J Clin Pathol 1990; 43(3): 213–219, https://doi.org/10.1136/jcp.43.3.213.
13. Wang B., Li D., Ou X., Yi Q., Feng Y. Diagnostic accuracy of Ber-EP4 for metastatic adenocarcinoma in serous effusions: a meta-analysis. PLoS One 2014; 9(9): e107741, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0107741.
14. Maguire B., Whitaker D., Carrello S., Spagnolo D. Monoclonal antibody Ber-EP4: its use in the differential diagnosis of malignant mesothelioma and carcinoma in cell blocks of malignant effusions and FNA specimens. Diagn Cytopathol 1994; 10(2): 130–134, https://doi.org/10.1002/dc.2840100207.
15. Волченко Н.Н., Борисова О.В. Роль эпителиального антигена Ber-EP4 в исследовании экссудата из серозных полостей. Российский онкологический журнал 2012; 2: 18–22.
16. Ordóñez N.G. Value of the Ber-EP4 antibody in differentiating epithelial pleural mesothelioma from adenocarcinoma: the M.D. Anderson experience and a critical review of the literature. Am J Clin Pathol 1998; 109(1): 85–89, https://doi.org/10.1093/ajcp/109.1.85.
17. Ordóñez N.G. The Immunohistochemical diagnosis of mesothelioma. Am J Surg Pathol 2003; 27(8): 1031–1051, https://doi.org/10.1097/00000478-200308000-00001.
18. Morimoto A., Ito A., Hashimoto K., Nakano A., Nagasaka T., Yokoi T. New diagnostic technique for rapid fluorescence immunocytochemical staining of adenocarcinoma and mesothelial cells using liquid-based cytology. Acta Cytol 2014; 58(5): 461–468, https://doi.org/10.1159/000367706.
19. Зиновьев С.В., Рачков В.В., Уткин О.В., Савос­ти­ко­ва М.В., Фурминская Е.Ю. Биочип для мультиплексного анализа и способ исследования клеток при диагностике онкологических заболеваний. Патент WO 2017/204674 A1. 2017.

Zinoviev S.V., Terentiev I.G., Utkin O.V., Furminskaya E.Yu., Fedoseeva E.S., Savostikova M.V. Biochip-SER Test System for Fluorescent Immunocytochemical Analysis of Ep-CAM Antigen Expression in Effusions and Washes. Sovremennye tehnologii v medicine 2018; 10(4): 34, https://doi.org/10.17691/stm2018.10.4.04