Интегральные и локальные методы оценки гемостазиологического профиля овец на различных этапах имплантации биодеградируемого сосудистого протеза

Цель исследования — оценить эффективность локальных и интегральных методов оценки гемостазиологического профиля овец на различных этапах имплантации биодеградируемого сосудистого протеза.

Материалы и методы. Объектом исследования явилась цельная кровь овец, которую забирали на этапе премедикации, в интраоперационный период и в ранний послеоперационный период. С помощью тромбоэластографии оценивали кинетику образования сгустка и изменение его вязкоупругих свойств в образцах цельной крови. Тест генерации тромбина выполняли в богатой (БТП) и обедненной тромбоцитами плазме (ОТП) с оценкой количественных и временны´х параметров. Концентрацию фактора тромбоцитов 4 в БТП и ОТП измеряли с помощью иммуноферментного анализа. Функциональную активность тромбоцитов оценивали в БТП с индукторами и без дополнительной стимуляции. Активность протромбинового комплекса, значения АЧТВ, тромбинового времени, концентрацию фибриногена, активность антитромбина III и протеина С, растворимые фибрин-мономерные комплексы и фибринолиз определяли в плазме крови.

Результаты. Выявлены разнонаправленные изменения гемостазиологического профиля на различных этапах имплантации сосудистого протеза: с одной стороны, усиление протромбогенного статуса, с другой — развитие гипокоагуляции. В пользу гиперкоагуляции свидетельствовало укорочение интервалов R (времени свертывания крови) и К (времени формирования сгустка), увеличение показателя angle (угла) и максимальной амплитуды на тромбоэластограмме во все исследуемые периоды относительно референсных значений, значительное увеличение фактора тромбоцитов 4 в БТП и усиление агрегации тромбоцитов. Однако количественные параметры теста генерации тромбина и ряд показателей коагулограммы указывали на гипокоагуляцию в интра­операционный и ранний послеоперационный периоды.

Заключение. Сравнительный анализ локальных тестов, характеризующих состояние гемостаза, и показателей интегральных методов продемонстрировал преимущества последних в оценке тромботических рисков при имплантации сосудистых протезов. Локальные тесты не дают возможности оценить динамику процесса коагуляции в режиме реального времени и не всегда чувствительны к гиперкоагуляции. Использование интегральных методов позволит восполнить эти пробелы, своевременно диагностировать гиперкоагуляцию и в дальнейшем минимизировать риски, сопровождающие имплантацию сосудистых протезов.

1. Swartz D.D., Andreadis S.T. Animal models for vascular tissue-engineering. Curr Opin Biotechnol 2013; 24(5): 916–925, https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.05.005.
2. Antonova L.V., Mironov A.V., Yuzhalin A.E., Krivkina E.O., Shabaev A.R., Rezvova M.A., Tkachenko V.O., Khanova M.Y., Sergeeva T.Y., Krutitskiy S.S., Barbarash L.S. A brief report on an implantation of small-caliber biodegradable vascular grafts in a carotid artery of the sheep. Pharmaceuticals (Basel) 2020; 13(5): 101, https://doi.org/10.3390/ph13050101.
3. Panteleev M.A., Hemker H.C. Global/integral assays in hemostasis diagnostics: promises, successes, problems and prospects. Thromb J 2015; 13(1): 5, https://doi.org/10.1186/s12959-014-0032-y.
4. Lipets E.N., Ataullakhanov F.I. Global assays of hemostasis in the diagnostics of hypercoagulation and evaluation of thrombosis risk. Thromb J 2015; 13(1): 4, https://doi.org/10.1186/s12959-015-0038-0.
5. Duarte R.C.F., Ferreira C.N., Rios D.R.A., Reis H.J.D., Carvalho M.D.G. Thrombin generation assays for global evaluation of the hemostatic system: perspectives and limitations. Rev Bras Hematol Hemoter 2017; 39(3): 259–265, https://doi.org/10.1016/j.bjhh.2017.03.009.
6. Kowalska M.A., Rauova L., Poncz M. Role of the platelet chemokine platelet factor 4 (PF4) in hemostasis and thrombosis. Thromb Res 2010; 125(4): 292–296, https://doi.org/10.1016/j.thromres.2009.11.023.
7. Favaloro E.J., Lippi G. On the complexity of hemostasis and the need for harmonization of test practice. Clin Chem Lab Med 2018; 56(10): 1568–1574, https://doi.org/10.1515/cclm-2018-0174.
8. Negrier C., Shima M., Hoffman M. The central role of thrombin in bleeding disorders. Blood Rev 2019; 38: 100582, https://doi.org/10.1016/j.blre.2019.05.006.
9. Cella G., Sbarai A., Mazzaro G., Motta G., Carraro P., Andreozzi G.M., Hoppensteadt D.A., Fareed J. Tissue factor pathway inhibitor release induced by defibrotide and heparins. Clin Appl Thromb Hemost 2001; 7(3): 225–228, https://doi.org/10.1177/107602960100700308.
10. Østergaard P., Nordfang O., Petersen L.C., Valentin S., Kristensen H. Is tissue factor pathway inhibitor involved in the antithrombotic effect of heparins? Biochemical considerations. Haemostasis 1993; 1: 107–111, https://doi.org/10.1159/000216919.
11. Nevzorova T.A., Mordakhanova E.R., Daminova A.G., Ponomareva A.A., Andrianova I.A., Le Minh G., Rauova L., Litvinov R.I., Weisel J.W. Platelet factor 4-containing immune complexes induce platelet activation followed by calpain-dependent platelet death. Cell Death Discov 2019; 5: 106, https://doi.org/10.1038/s41420-019-0188-0.
12. Datta P., Zhang F., Dordick J.S., Linhardt R.J. Platelet factor 4 polyanion immune complexes: heparin induced thrombocytopenia and vaccine-induced immune thrombotic thrombocytopenia. Thrombosis J 2021; 19(1): 66, https://doi.org/10.1186/s12959-021-00318-2.
13. Monroe D.M., Hoffman M., Roberts H.R. Platelets and thrombin generation. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2002; 22(9): 1381–1389, https://doi.org/10.1161/01.atv.0000031340.68494.34.
14. Rezaie A.R. Regulation of the protein C anticoagulant and antiinflammatory pathways. Curr Med Chem 2010; 17(19): 2059–2069, https://doi.org/10.2174/092986710791233706.

Gruzdeva O.V., Bychkova E.E., Penskaya T.Yu., Kuzmina A.A., Antonova L.V., Barbarash L.S. Integral and Local Methods for the Evaluation of the Hemostasiological Profile in Sheep at Various Stages of Implantation of a Biodegradable Vascular Graft. Sovremennye tehnologii v medicine 2022; 14(5): 26, https://doi.org/10.17691/stm2022.14.5.03