Влияние криообработки на препараты аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами

Тромбоцитарный фактор роста (platelet-derived growth factor, PDGF) играет важную роль в ангиогенезе, влияет на активацию миг­рации и пролиферации мезенхимальных стволовых клеток, фибробластов, гладкомышечных клеток, остеобластов; активацию миграции моноцитов, макрофагов и нейтрофилов.

Цель исследования — изучить влияние криообработки на качественные свойства аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами (АОТ), в различные временны΄е отрезки.

Материалы и методы. Препараты аутологичной плазмы получали из крови 31 донора. Биологический материал подвергали двукратному центрифугированию по протоколу получения P-PRP и L-PRP. В свежих препаратах АОТ изучали количество тромбоцитов и концентрацию факторов роста (PDGF-AA и PDGF-BB). В замороженных образцах АОТ определяли концентрацию PDGF-AA и PDGF-BB через 2 нед и через 2 мес после криообработки при температуре –35°С. Исследовали образцы P-PRP и L-PRP, активированные 10% раствором СаCl₂ и неактивированные.

Результаты. Препараты L-PRP значительно превосходят препараты P-PRP, поскольку в них отмечено увеличение количества тромбоцитов в 1,7 раза. Уровень PDGF-AA в неактивированной L-PRP в 1,8 раза выше по сравнению с неактивированной P-PRP (p<0,05). В активированной L-PRP уровень PDGF-AA в 1,5 раза выше, чем в активированной P-PRP (p<0,05). Уровень PDGF-BB в неактивированной L-PRP в 2,9 раза выше по сравнению с неактивированной P-PRP и в 1,8 раза выше в активированной L-PRP, чем в активированной P-PRP (p<0,05). Концентрация PDGF-BB в неактивированной P-PRP резко увеличивается на 2-й неделе после заморозки и через 2 мес остается на том же уровне (p<0,05). Концентрация PDGF-BB в активированной плазме не изменяется (p>0,05).

Заключение. Процесс криообработки неактивированной аутоплазмы L-PRP позволяет сохранять и в последующем усиливать свойства плазмоконцентрата, что дает возможность применять его в клинической практике.

1. Brown S.A., Levi B., Lequex C., Wong V.W., Mojallal A., Longaker M.T. Basic science review on adipose tissue for clinicians. Plast Reconstr Surg 2010; 126(6): 1936–1946, https://doi.org/10.1097/prs.0b013e3181f44790.
2. Turner A., Abu-Ghname A., Davis M.J., Winocour S.J., Hanson S.E., Chu C.K. Fat grafting in breast reconstruction. Semin Plast Surg 2020; 34(1): 17–23, https://doi.org/10.1055/s-0039-1700959.
3. Rigotti G., Marchi A., Galiè M., Baroni G., Benati D., Krampera M., Pasini A., Sbarbati A. Clinical treatment of radiotherapy tissue demage by lipoaspirate transplant: a healing process mediated by adipose-derived adult stem cells. Plast Reconstr Surg 2007; 119(5): 1409–1422, https://doi.org/10.1097/01.prs.0000256047.47909.71.
4. Locke M.B., de Chalain T.M. Current practice in autologous fat transplantation: suggested clinical guidelines based on a review of recent literature. Ann Plast Surg 2008; 60(1): 98–102, https://doi.org/10.1097/sap.0b013e318038f74c.
5. Fernandes G., Yang S. Application of platelet-rich plasma with stem cells in bone and periodontal tissue engineering. Bone Res 2016; 4: 16036, https://doi.org/10.1038/boneres.2016.36.
6. Kon E., Filardo G., Di Matteo B., Marcacci M. PRP for the treatment of cartilage pathology. Open Orthop J 2013; 7: 120–128, https://doi.org/10.2174/1874325001307010120.
7. Gonshor A. Technique for producing platelet-rich plasma and platelet concentrate: background and process. Int J Periodontics Restorative Dent 2002; 22(6): 547–557.
8. Marx R.E., Carlson E.R., Eichstaedt R.M., Schimmele S.R., Strauss J.E., Georgeff K.R. Platelet-rich plasma: growth factor enhancement for bone grafts. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 1998; 85(6): 638–646, https://doi.org/10.1016/s1079-2104(98)90029-4.
9. Marx R.E. Platelet-rich plasma (PRP): what is PRP and what is not PRP? Implant Dent 2001; 10(4): 225–228, https://doi.org/10.1097/00008505-200110000-00002.
10. Jain N.K., Gulati M. Platelet-rich plasma: a healing virtuoso. Blood Res 2016; 51(1): 3–5, https://doi.org/10.5045/br.2016.51.1.3.
11. Marx R.E. In situ tissue engineering bone regeneration in jaw reconstructiong. Transl Regen Med 2015; 31: 437–447, https://doi.org/10.1016/b978-0-12-410396-2.00031-1.
12. Kevy S.V., Jacobson V.S. Comparison of methods for point of care preparation of autologous platelet gel. J Extra Corpr Technol 2004; 36(1): 28–35.
13. Alves R., Grimalt R. A review of platelet-rich plasma: history, biology, mechanism of action, and classification. Skin Appendage Disord 2018; 4(1): 18–24, https://doi.org/10.1159/000477353.
14. Eppley B.L., Woodell J.E., Higgins J. Platelet quantification and growth factor analysis from platelet-rich plasma: implications for wound healing. Plast Reconstr Surg 2004; 114(6): 1502–1508, https://doi.org/10.1097/01.prs.0000138251.07040.51.
15. Weibrich G., Kleis W.K., Kunz-Kostomanolakis M., Loos A.H., Wagner W. Correlation of platelet concentration in platelet-rich plasma to the extraction method, age, sex, and platelet count of the donor. Int J Oral Maxillofac Implants 2001; 16(5): 693–699.
16. Issa J.P.M., Tiossi R., da Silva Mello A.S., Lopes R.A., Di Matteo M.A.S., Iyomasa M.M. PRP: a possibility in regenerative therapy. Int J Morphol 2007; 25(3): 587–590, https://doi.org/10.4067/s0717-95022007000300019.
17. Sarban S., Tabur H., Baba F., Işıkan U.E. The positive impact of platelet-derived growth factor on the repair of full-thickness defects of articular cartilage. Eklem Hastalik Cerrahisi 2018; 30(2): 91–96, https://doi.org/10.5606/ehc.2019.64018.
18. Samadi P., Sheykhhasan M., Khoshinani H.M. The use of platelet-rich plasma in aesthetic and regenerative medicine: a comprehensive review. Aesthetic Plast Surg 2019; 43(3): 803–814, https://doi.org/10.1007/s00266-018-1293-9.
19. Masuki H., Okudera T., Watanebe T., Suzuki M., Nishiyama K., Okudera H., Nakata K., Uematsu K., Su C.Y., Kawase T. Growth factor and pro-inflammatory cytokine contents in platelet-rich plasma (PRP), plasma rich in growth factors (PRGF), advanced platelet-rich fibrin (A-PRF), and concentrated growth factors (CGF). Int J Implant Dent 2016; 2(1): 19, https://doi.org/10.1186/s40729-016-0052-4.
20. Mazzocca A.D., McCarthy M.B.R., Chowaniec D.M., Cote M.P., Romeo A.A., Bradley J.P., Arciero R.A., Beitzel K. Platelet-rich plasma differs according to preparation method and human variability. J Bone Joint Surg Am 2012; 94(4): 308–316, https://doi.org/10.2106/jbjs.k.00430.
21. Ehrenfest D.M., Bielecki T., Mishra A., Borzini P., Inchingolo F., Sammartino G., Rasmusson L., Everts P.A. In search of a consensus terminology in the field of platelet concentrates for surgical use: platelet-rich plasma (PRP), platelet-rich fibrin (PRF), fibrin gel polymerization and leukocytes. Curr Pharm Biotechnol 2012; 13(7): 1131–1137, https://doi.org/10.2174/138920112800624328.
22. Зорина А.И., Зорин В.Л., Черкасов В.Р. PRP в эсте­ти­ческой медицине. Экспериментальная и клини­ческая дер­матокосметология 2013; 6: 10–21.
23. Mishra A., Pavelko T. Treatment of chronic elbow tendinosis with buffered platelet-rich plasma. Am J Sports Med 2006; 34(11): 1774–1778, https://doi.org/10.1177/0363546506288850.
24. Wasterlain A.S., Braun H.J., Dragoo J.L. Contents and formulations of platelet-rich plasma. Oper Tech Orthop 2012; 22(1): 33–42, https://doi.org/10.1053/j.oto.2011.11.001.
25. Старцева О.И., Мельников Д.В., Захаренко А.С., Ки­рил­лова К.А., Пищикова Е.Д., Епифанова М.В., Сафро­нов В.В., Истранов А.Л. Способ аугментационной маммо­пластики. Патент РФ 2675019. 2018.
26. Andia I., Sánchez M., Maffulli N. Joint pathology and platelet-rich plasma therapies. Expert Opin Biol Ther 2012; 12(1): 7–22, https://doi.org/10.1517/14712598.2012.632765.
27. Eppley B., Pietrzak W.S., Blanton M. Platelet-rich plasma: a review of biology and applications in plastic surgery. Plast Reconstr Surg 2006; 118(6): 147e–159e, https://doi.org/10.1097/01.prs.0000239606.92676.cf.
28. Kazakos K., Lyras D.N., Verettas D., Tilkeridis K., Tryfonidis M. The use of autologous PRP gel as an aid in the management of acute trauma wounds. Injury 2009; 40(8): 801–805, https://doi.org/10.1016/j.injury.2008.05.002.
29. Dohan D.M., Choukroun J., Diss A., Dohan S.L., Dohan A.J., Mouhyi J., Gogly B. Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part II: platelet-related biologic features. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2006; 101(3): e45–e50, https://doi.org/10.1016/j.tripleo.2005.07.009.
30. Agrawal A.A. Evolution, current status and advances in application of platelet concentrate in periodontics and implantology. World J Clin Cases 2017; 5(5): 159–171, https://doi.org/10.12998/wjcc.v5.i5.159.

Melnikov D.V., Kirillova K.A., Zakharenko A.S., Sinelnikov M.Y., Ragimov A.A., Istranov A.L., Startseva O.I. Effect of Cryo-Processing on Platelet-Rich Autoplasma Preparations. Sovremennye tehnologii v medicine 2020; 12(6): 54, https://doi.org/10.17691/stm2020.12.6.07