Детекция мажорных мутаций в генах CFTR, SERPINA1, HFE при фенотипе доброкачественной неконъюгированной гипербилирубинемии

Введение

Актуальность поиска молекулярно-генетических маркеров доброкачественной неконъюгированной гипербилирубинемии не вызывает сомнений, так как данная патология широко распространена. Частота синдрома Жильбера (СЖ) в популяции составляет около 10%. Для СЖ характерна вариабельная экспрессивность и пенетрантность, что говорит о неполноте фундаментальных знаний об этом синдроме [1]. Недостаточная корреляция «фенотип–генотип» является одним из важных критериев олигогенности болезни. Вероятно, для европеоидного населения кроме частого варианта rs3064744 гена UGT1A1 существуют другие варианты нуклеотидной последовательности генов и молекулярно-генетические механизмы, которые могут объяснить разную степень проявления клинических симптомов неконъюгированной гипербилирубинемии при разных генотипах варианта гена UGT1A1.

Как показывает клиническая практика, на течение доброкачественной неконъюгированной гипербилирубинемиии может влиять носительство редких аллелей мутаций, которые вызывают другие заболевания (муковисцидоз, альфа-1-антитрипсиновая недостаточность, гемохроматоз), нарушающие функции печени.

Развитие муковисцидоза связано с мутациями в гене CFTR, которые приводят к нарушению функции хлоридного канала, контролирующего секрецию и абсорбцию воды и ионов в эпителиальных тканях. Наиболее распространенной мутацией в гене CFTR при муковисцидозе является вариант rs113993960 (ΔF508) гена CFTR (OMIM 602421).

Наследственный гемохроматоз первого типа развивается вследствие мутаций в гене HFE, вызывающих дисфункцию белка — регулятора абсорбции железа. Большинство случаев наследственного гемохроматоза первого типа связывают с вариантами rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE (OMIM 235200).

Причиной развития альфа-1-антитрипсиновой недостаточности являются мутации в гене SERPINA1 (наиболее часто — варианты rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена), приводящие к нарушению функции кодируемого геном белка — ингибитора сериновой протеазы.

Такие мутации вызывают серьезные нарушения функций гепатоцитов, что значительно снижает их способность адаптироваться и компенсировать любые вредные воздействия и факторы, в первую очередь химической и биологической природы. Например, описаны случаи тяжелого поражения печени при сочетании редких вариантов гена UGT1A1 с мутациями в гене HFE [2].

Таким образом, целью исследования является анализ ассоциации доброкачественной неконъюгированной гипербилирубинемии с мажорными мутациями rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1.

Материалы и методы

Дизайн исследования — «случай–контроль».

Группа лиц с фенотипом СЖ (n=414; средний возраст — 36,7±15,9 года; 49,8% мужчин и 50,2% женщин) сформирована врачами-гастроэнтерологами. В нее включены лица с неконъюгированной гипербилирубинемией, прошедшие стандартное клиническое обследование. Лиц с известными причинами неконъюгированной гипербилирубинемии в исследование не включали. ДНК была выделена методом фенол-хлороформной экстракции или экспресс-методом (ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА; ООО «ДНК-Технология», Москва) из венозной крови.

Контрольная группа (n=429; средний возраст — 38,5±14,3 года; 52,2% мужчин и 47,8% женщин) — случайная выборка лиц из банков ДНК участников проекта MONICA (Multinational MONItoring of trends and determinants in CArdiovascular disease), скрининга молодых людей 25–44 лет и одномоментного исследования школьников г. Новосибирска. ДНК была выделена методом фенол-хлороформной экстракции из венозной крови.

Исследование одобрено этическим комитетом НИИТПМ — филиала ИЦиГ СО РАН — и соответствует требованиям Хельсинкской декларации (2013). Все участники исследования подписали добровольное информированное согласие на молекулярно-генетический анализ.

Группы статистически значимо не отличались друг от друга по полу и возрасту.

В обеих группах методом полимеразной цепной реакции определены частоты генотипов rs3064744 (количество ТА-повторов в промоторе) гена UGT1А1; методика генотипирования описана в предыдущих публикациях [3].

Генотипирование групп по вариантам нуклеотидной последовательности rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 проведено методом полимеразной цепной реакции, полимеразной цепной реакции с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов на полиакрил­амид­ных гелях.

Для генотипирования по варианту rs1799945 (H63D) использовали праймеры 5’-TGGTCTTTCCTTGTTTGAAGC-3’(F) и 5’-TCCATAATAGTCCAGAAGTCAACAG-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 2,5 мМ MgCl₂, по 0,4 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 35 циклов, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 60°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Рестрикцию выполняли с 10 единицами активности рестриктазы Ksp22 I («СибЭнзайм», Новосибирск). Размер продукта амплификации — 195 п.н. После проведения рестрикции при генотипе CC детектировались продукты 137 и 58 п.н., при генотипе GG — 195 п.н., при гетерозиготном генотипе CG — 195, 137 и 58 п.н.

Для генотипирования по rs1800562 (C282Y) использовали праймеры 5’-CCCTGGGGAAGAGCAGAGAT-3’(F) и 5’-CCTTTGATTGCCACCCTC-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 2,5 мМ MgCl₂, по 0,4 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 35 циклов, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 60°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Рестрикцию выполняли с 10 единицами активности рестриктазы Rsa I («СибЭнзайм», Новосибирск). Размер продукта амплификации — 207 п.н. После проведения рестрикции при генотипе AA детектировались продукты 137 и 76 п.н., при генотипе GG — 207 п.н., при гетерозиготном генотипе GA — 207, 131 и 76 п.н.

Для генотипирования по rs1800730 (S65C) использовали праймеры 5’-TGTTGCTCTGTCTCCAGGT-3’(F) и 5’-CTGGAAACCCATGGAGTTC-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 3,5 мМ MgCl₂, по 0,8 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 35 циклов, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 58°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Рестрикцию выполняли с 10 единицами активности рестриктазы Hinf I («СибЭнзайм», Новосибирск). Размер продукта амплификации — 171 п.н. После проведения рестрикции при генотипе TT детектировался продукт 171 п.н., при генотипе AA — 133 и 38 п.н., при гетерозиготном генотипе AT — 171, 133 и 38 п.н.

Для генотипирования по rs113993960 (ΔF508) гена CFTR использовали праймеры 5’-TTTTCCTGGATTATGCCTGGCACC-3’(F) и 5’-GTTGGCATGCTTTGATGACGCTTC-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 2,5 мМ MgCl₂, по 0,4 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 33 цикла, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 63°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Детекцию продуктов амплификации выполняли в 10% полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием. Размер продукта амплификации при генотипе II — 97 п.н., ID — 97, 94 и 3 п.н., DD — 94 и 3 п.н.

Для генотипирования по rs28929474 (PIZ) использовали праймеры 5’-ATAAGGCTGTGCTGACCATCGTC-3’(F) и 5’-TTGGGTGGGATTCACCACTTTTC-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 2,5 мМ MgCl₂, по 0,4 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 35 циклов, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 56°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Рестрикцию проводили с 10 единицами активности рестриктазы Taq I («СибЭнзайм», Новосибирск). Размер продукта амплификации — 179 п.н. После проведения рестрикции при генотипе GG детектировались продукты 160 и 19 п.н., при генотипе AA — 179 п.н., при гетерозиготном генотипе GA — все перечисленные продукты (179, 160 и 19 п.н.)

Для генотипирования по rs17580 (PIS) использовали праймеры 5’-TGAGGGGAAACTACAGCACCTCG-3’(F) и 5’-AGGTGTGGGCAGCTTCTTGGTCA-3’(R). Смесь для ПЦР объемом 25 мкл включала: 75 мM Трис-HCI (pH=9,0), 20 мM (NH₄)₂SO₄, 0,01% Тween-20, 3,5 мМ MgCl₂, по 0,8 мМ каждого праймера, 0,2 мМ смеси dNTP, 2 мкг ДНК, 1 единицу активности ДНК-полимеразы. Амплификацию проводили при следующих условиях: 35 циклов, включающих денатурацию, — 95°С в течение 30 с, отжиг праймеров — 61°С в течение 30 с и элонгацию — 72°С в течение 30 с. Рестрикцию выполняли с 10 единицами активности рестриктазы Taq I («СибЭнзайм», Новосибирск). Размер продукта амплификации — 121 п.н. После проведения рестрикции при генотипе AA детектировались продукты 100 и 21 п.н., при генотипе TT — продукт 121 п.н., при гетерозиготном генотипе AT — все перечисленные продукты (121, 100 и 21 п.н.)

Статистический анализ. Полученные результаты генотипирования статистически обработаны с помощью пакета программ SPSS 16.0. С использованием критерия χ² оценено соответствие частот генотипов равновесию Харди–Вайнберга в контрольной группе. Сравнение групп по частотам генотипов и аллелей, относительный риск по конкретному аллелю или генотипу вычислены с помощью таблиц сопряженности с использованием критерия ÷² по Пирсону, точного двустороннего критерия Фишера с поправкой Йетса на непрерывность. За уровень значимости принимали p<0,05.

Результаты

Частоты генотипов мутации rs3064744 (количество ТА-повторов в промоторе) гена UGT1А1 в группе СЖ и контрольной группе представлены на рис. 1. По частотам генотипов варианта rs3064744 найдены статистически значимые различия между группами (р<0,001). Генотип 7ТА/7ТА мутации rs3064744 чаще встречается в группе лиц с неконъюгированной гипербилирубинемией по сравнению с контрольной группой (ОШ=20,6; 95% ДИ: 14,2–29,9; р<0,001).

---

Рис. 1. Частоты генотипов мутации rs3064744 гена UGT1А1 в группе с синдромом Жильбера и в контрольной группе (p<0,001)

---

В контрольной группе наблюдаемые частоты генотипов вариантов нуклеотидной последовательности rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 соответствуют ожидаемым согласно равновесию Харди–Вайнберга (÷²=0,60; 0,38; 0,16; 0,001; 0,05; 0,03 соответственно).

По частотам генотипов и аллелей rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 не найдено статически значимых различий между группой СЖ и контрольной группой (р>0,05). Частоты этих генотипов представлены на рис. 2–4.

---

Рис. 2. Частоты генотипов варианта rs1799945 (H63D) (а), s1800562 (C282Y) (б) и rs1800730 (S65C) (в) гена HFE в группе с синдромом Жильбера и в конт­рольной группе

---

Рис. 3. Частоты генотипов варианта rs113993960 (ΔF508) гена CFTR в группе с синдромом Жильбера и в контрольной группе

---

Рис. 4. Частоты генотипов варианта rs28929474 (PIZ) (а), rs17580 (PIS) (б) гена SERPINA1 в группе с синдромом Жильбера и в контрольной группе

---

В группе с СЖ 64% участников не являются носителями редких аллелей изученных вариантов олигогенных заболеваний печени — rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, ΔF508 гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1.

6 из 24 человек группы с СЖ с генотипом 6ТА/6ТА варианта rs3064744 являются носителями гетерозиготного генотипа CG rs1799945 (H63D) гена HFE, 1 человек — гетерозиготного генотипа GA rs28929474 (PIZ) гена SERPINA1,также1 человек — гетерозиготных генотипов AT rs17580 (PIS) гена SERPINA1 и ID rs113993960 (ΔF508) гена CFTR.

32 человека из 84 с генотипом 6ТА/7ТА варианта rs3064744 являются носителями одной мажорной мутации в гетерозиготном состоянии — rs1800730 (S65C) гена HFE/rs113993960 (ΔF508) гена CFTR/rs28929474 (PIZ) гена SERPINA1 или в гомозигот­ном/гетерозиготном состоянии — rs1799945 (H63D) гена HFE.

У 102 человек из 303 с генотипом 7ТА/7ТА rs3064744 обнаружено носительство редких аллелей вариантов rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1. Так, мальчик 14 лет (7ТА/7ТА rs3064744; концентрация общего билирубина, с которым пациент попал в поле зрения направившего его на исследование врача, — 57,0 мкмоль/л) является носителем гетерозиготного генотипа CG rs1799945 (H63D) гена HFE и гетерозиготного генотипа AT rs17580 (PIS) гена SERPINA1. 2 человека с генотипом 7ТА/7ТА rs3064744 и гетерозиготным генотипом CG rs1799945 (H63D) гена HFE также имеют гетерозиготный генотип AT rs1800730 (S65C) гена HFE (женщина 39 лет с концентрацией общего билирубина 51,8 мкмоль/л и мужчина 46 лет без данных биохимического исследования). У девушки 17 лет (7ТА/7ТА rs3064744) обнаружен гетерозиготный генотип AT rs1800730 (S65C) гена HFE и гетерозиготный генотип ID ΔF508 гена CFTR (концентрация общего билирубина — 39,4 мкмоль/л).

У девушки 22 лет с эпизодом высокой концентрации общего (170,0 мкмоль/л) и несвязанного билирубина (155,8 мкмоль/л) верифицирован редкий генотип 5ТА/7ТА варианта rs3064744 гена UGT1A1, гетерозиготный генотип CG варианта rs1799945 (H63D) гена HFE и гомозиготный генотип ТТ варианта rs17580 (PIS) гена SERPINA1. Кроме того, по результатам секвенирования по Сэнгеру гена UGT1A1 данная пациентка является носителем миссенс-варианта rs2125984650 в первом экзоне гена UGT1A1 (c.188A>T, p.Asp63Val) неопределенной клинической значимости.

В группе контроля 67,8% человек не являются носителями редких аллелей изученных вариантов rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1.В этой группе также встречаются носители редких аллелей нескольких вариантов, однако из-за отсутствия данных о состоянии гепатобилиарной системы, концентрации общего и неконъюгированного билирубина описание этих сочетаний не представляет научной ценности.

Статистически значимых различий по сочетаниям генотипов вариантов rs3064744 гена UGT1А1 с генотипами вариантов rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 между группамине обнаружено.

Обсуждение

Ген HFE (homeostatic iron regulator, 6p22.2) кодирует мембранный белок, который, как предполагается, регулирует абсорбцию железа за счет влияния на взаимодействие трансферрина и его рецептора [4]. Дефекты гена HFE (rs1799945 — g.26090951C>G, p.His63Asp, H63D; rs1800562 — g.26092913G>A, p.Cys282Tyr, C282Y; rs1800730 — g.26090957A>T, p.Ser65Cys, S65C) приводят к развитию наследственного гемохроматоза (аутосомно-рецессивный тип наследования), который характеризуется чрезмерным всасыванием железа, что в свою очередь приводит к интоксикации организма, циррозу печени, смерти [5].

Ген CFTR (CF transmembrane conductance regulator, 7q31.2) кодирует белок, который функционирует в качестве хлоридного канала, контролирует ионную и водную секрецию и абсорбцию эпителиальными клетками. Наиболее частая мутация гена — ΔF508 (rs113993960, p. Phe508del) приводит к нарушению сборки и транспорта белка, вызывая развитие муковисцидоза (аутосомно-рецессивный тип наследования) [6]. Муковисцидоз характеризуется развитием хронической легочной инфекции и воспаления, экзокринной недостаточности поджелудочной железы, мужского бесплодия, а также может включать несколько сопутствующих заболеваний, связанных с муковисцидозом, таких как диабет и патология печени [7]. Гетерозиготное носительство мутации ΔF508 ассоциировано с повышенным риском развития панкреатита, мужского бесплодия, бронхоэктазов, диабета, холелитиаза и других состояний [8].

Ген SERPINA1 (serpin family A member 1, 14q32.13) кодирует белок альфа-1-антитрипсин, который синтезируется в печени, костном мозге, лимфоидной ткани, кишке; дефекты гена приводят к альфа-1-антитрипсиновой недостаточности (аутосомно-рецессивный тип наследования), выражающейся в хронических обструктивных заболеваниях легких, эмфиземе, хронических заболеваниях печени [9]. Наиболее частые варианты гена SERPINA1, приводящие к альфа-1-антитрипсиновой недостаточности, — rs28929474 (c.1096G>A, p.Glu366Lys, PIZ), rs17580 (c.863A>T, p.Glu288Val, PIS).

В нашей работе изучена взаимосвязь белков, кодируемых генами HFE, CFTR, SERPINA1, UGT1А1, с использованием платформы STRING (https://string-db.org). Согласно данным платформы, исследование методом аффинной хроматографии свидетельствует о возможной функциональной связи между белковыми продуктами генов CFTR и SERPINA1. Коэкспрессия ортологов генов HFE и SERPINA1 наблюдалась для серой крысы и риса посевного.

Известно, что взаимодействие генов может изменять их экспрессию, влиять на манифестацию и проявление клинических симптомов заболеваний. Некоторые заболевания, ранее считавшиеся моногенными (один ген — одно заболевание), на данный момент относятся к олигогенным или даже полигенным в связи с влиянием на их развитие факторов окружающей среды [10]. На данный момент, согласно базе данных the OLIgogenic diseases DAtabase (OLIDA; https://olida.ibsquare.be/), муковисцидоз и наследственный гемохроматоз можно отнести к олигогенным заболеваниям, в развитие которых вносят вклад не только гены CFTR и HFE, но и ряд других.

В литературе встречаются упоминания о сочетанном носительстве вариантов генов CFTR и SERPINA1 в случаях клинической картины муковисцидоза, но без гомозиготного носительства варианта гена CFTR. Это, по мнению M.D. Ramos с соавт. [11], говорит о том, что подобный фенотип является результатом сочетания генотипов нескольких генов (в исследование помимо гена SERPINA1 были включены гены SCNN1A, SCNN1B, SCNN1G). Влияние альфа-1-антитрипсина на уровень белка CFTR показано в исследовании на культуре клеток [12]. Есть данные о связи мутаций гена HFE с развитием мекониального илеуса и патологии печени при муковисцидозе [13].

В связи с вышесказанным мы предположили, что на клиническое течение СЖ также могут влиять варианты генов HFE, CFTR и SERPINA1. По результатам проведенного исследования не выявлено ассоциации СЖ с вариантами нуклеотидной последовательности rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, ΔF508 гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1. Однако для некоторых пациентов было найдено сочетанное носительство генотипа 6ТА/6ТА или 6ТА/7ТА rs3064744 и редких аллелей нескольких из изученных вариантов. Кроме того, у некоторых пациентов с генотипом 7ТА/7ТА rs3064744 также были обнаружены сочетания с другими вариантами, которые могут объяснить значительное повышение концентрации билирубина.

Таким образом, для лиц с фенотипом СЖ (при исключении других причин неконъюгированной гипербилирубинемии, кроме генетических) в случае обнаружения значительного повышения концентрации общего/неконъюгированного билирубина и/или при генотипе 6ТА/6ТА, 6ТА/7ТА rs3064744 целесо­образно проведение исследования на поиск носительства редких аллелей вариантов rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1.

Ограничением данного исследования является отсутствие данных о клиническом течении неконъю­гированной гипербилирубинемии в группе СЖ (доступными являются только данные об уровне общего и несвязанного билирубина, с которыми пациент обратился к врачу). Группа контроля представляет собой случайную выборку, что не исключает присутствия в ней небольшого числа лиц с диагностированным или недиагностированным СЖ.

Заключение

В результате проведенного исследования не выявлено статистически значимых различий по частотам генотипов и аллелей вариантов нуклеотидной последовательности rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 между группой лиц с неконъюгированной гипербилирубинемией и конт­ролем. При анализе сочетаний генотипов варианта rs3064744 (количество ТА повторов в промоторе) гена UGT1А1 с генотипами вариантов rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 также не выявлено значимых различий между группами. Таким образом, можно сделать вывод, что в исследуемой выборке варианты нуклеотидной последовательности rs1799945 (H63D), rs1800562 (C282Y), rs1800730 (S65C) гена HFE, rs113993960 (ΔF508) гена CFTR, rs28929474 (PIZ), rs17580 (PIS) гена SERPINA1 не ассоциированы с неконъюгированной гипербилирубинемией.

Благодарности. Авторы выражают глубокую признательность врачам-терапевтам и гастроэнтерологам г. Новосибирска за помощь в формировании группы лиц с синдромом Жильбера и д.м.н. Малютиной Софье Константиновне, д.м.н. Денисовой Диане Вахтанговне за предоставленную возможность сформировать контрольную группу из банков ДНК проекта MONICA, скрининга школьников и молодых людей.

Финансирование. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда №23-25-00062.

Конфликт интересов отсутствует.