Сегодня: 29.11.2023
RU / EN
Последнее обновление: 30.10.2023
Биолюминесцентный имиджинг опухолевых клеток in vivo с применением оптимизированной люциферазы светляка luc2

Биолюминесцентный имиджинг опухолевых клеток in vivo с применением оптимизированной люциферазы светляка luc2

Н.В. Клементьева, М.В. Ширманова, Е.О. Серебровская, А.Ф. Фрадков, А.В. Мелешина, Л.Б. Снопова, Н.Н. Проданец, С.А. Лукьянов, Е.В. Загайнова
Ключевые слова: биолюминесцентный имиджинг; оптимизированная люцифераза светляка luc2; первичная опухоль; модель метастазирования.
2013, том 5, номер 3, стр. 6.

Полный текст статьи

pdf
0
2960

Цель исследования — создание опухолевой клеточной линии, стабильно экспрессирующей люциферазу luc2, и разработка методики наблюдения первичных узлов опухоли и метастазов с помощью биолюминесцентного имиджинга in vivo.

Материалы и методы. Использованы плазмиды pLuc2-N и лентивирусный вектор pLVT-1 («Лаборатория молекулярных технологий», ИБХ РАН, Россия), клеточная линия Colo 26 (МНИОИ им. П.А. Герцена, Россия). Работа выполнена на мышах линии BALB/c. Биолюминесцентное наблюдение in vitro и in vivo проводили на установке IVIS-Spectrum (Caliper Life Sciences, США). Модель первичной опухоли создавали путем подкожной инъекции 500 000 клеток, модель метастазов — путем внутривенной инъекции 75 000 опухолевых клеток мышам. Для верификации опухоли и метастазов выполняли патоморфологический анализ с окраской парафиновых срезов гематоксилин-эозином.

Результаты. Методами молекулярного клонирования получен лентивирусный вектор, несущий ген оптимизированной люциферазы светляка luc2. С помощью данной генетической конструкции создана стабильная линия опухолевых клеток Colo 26–luc2. Определена чувствительность метода биолюминесцентного имиджинга на основе Colo 26–luc2: in vitro интенсивность свечения в среднем составила около 5000 фотон/с на клетку, in vivo — 250 фотон/с на клетку. Созданы модели первичного опухолевого узла и метастазов на основе Colo 26–luc2. Результаты биолюминесцентного имиджинга полученных моделей соотнесены с данными гистологического исследования.

Заключение. Выполненная работа демонстрирует возможности биолюминесцентного имиджинга на основе оптимизированной люциферазы luc2 для прижизненной неинвазивной визуализации опухолевых процессов на уровне целого организма.

Klementyeva N.V., Shirmanova M.V., Serebrovskaya Е.О., Fradkov А.F., Meleshina А.V., Snopova L.B., Prodanets N.N., Lukyanov S.А., Zagaynova Е.V. In Vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Cells Using Optimized Firefly Luciferase luc2. Sovremennye tehnologii v medicine 2013; 5(3): 6


Журнал базах данных

pubmed_logo.jpg

web_of_science.jpg

scopus.jpg

crossref.jpg

doaj.jpg

ebsco.jpg

embase.jpg

ulrich.jpg

cyberleninka.jpg

e-library.jpg

lan.jpg

ajd.jpg

vak.jpg