Синтез цитокинов лимфоцитами in vitro у детей в ремиссии ювенильного идиопатического артрита на фоне терапии генно-инженерными биологическими препаратами

Цель исследования — оценить способность лимфоцитов к спонтанному и стимулированному синтезу цитокинов in vitro у детей, находящихся в ремиссии ювенильного идиопатического артрита, на фоне терапии генно-инженерными биологическими препаратами в сочетании с иммуносупрессантами.

Материалы и методы. Обследовано 18 детей (8 девочек и 10 мальчиков) в возрасте от 2 до 12 лет с различными вариантами ювенильного идиопатического артрита, в лечении которых применялись генно-инженерные биологические препараты в сочетании с иммуносупрессантами, без назначения глюкокортикоидов. Средняя длительность терапии биологическими агентами составила 3,8 года. На момент включения в исследование у всех пациентов была зафиксирована ремиссия болезни в соответствии с критериями Wallace. Контрольную группу составили 12 детей без хронических заболеваний, которые не получали никаких лекарственных препаратов. Оценивали спонтанную и индуцированную фитогемагглютинином (ФГА) выработку цитокинов (IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, G-CSF, IFN-γ, TNF-α), а также индекс стимуляции их синтеза. Концентрацию цитокинов в культуре цельной крови определяли методом проточной флюориметрии с использованием готовых мультиплексных тест-систем (панели Bio-Plex Pro Human Cytokine) для анализатора Bio-Plex 200 (программа Bio-Plex Manager, версия 5.0) (Bio-Rad, США).

Результаты. При сопоставлении активности спонтанной и стимулированной продукции цитокинов у детей с ювенильным идиопатическим артритом и детей группы контроля у больных выявлено значимое снижение уровня спонтанного синтеза IL-4, IL-6, IL-8, G-CSF, IFN-γ, TNF-α и отсутствие значимых различий спонтанной продукции IL-2 и IL-10. При исследовании культур, стимулированных ФГА, у детей с артритом отмечена более высокая продукция IL-2, IL-4, IL-6, сниженная — IL-10 и отсутствие статистически значимых различий в продукции IL-8, G-CSF, IFN-γ, TNF-α. Вычисленные индексы стимуляции в обеих группах детей не различались для G-CSF, IL-8 и TNF-α, были значимо выше для IL-2, IL-4, IL-6, IFN-γ и снижены для IL-10.

Заключение. Отсутствие значимых различий уровней стимулированной продукции IL-8, G-CSF, IFN-γ, TNF-α у больных ювенильным идиопатическим артритом и у детей группы сравнения в сочетании с повышением стимулированного синтеза IL-2, IL-4, IL-6 у детей с артритом свидетельствует о сохраненной реактивности организма в условиях длительной терапии генно-инженерными биологическими препаратами у детей с ювенильным идиопатическим артритом.

1. Алексеева Е.И., Литвицкий П.Ф., Баранов А.А. Юве­нильный ревматоидный артрит: этиология, патогенез, кли­­ника, алгоритмы диагностики и лечения. Под ред. Бара­нова А.А. М; 2007.
2. Алексеева Е.И., Валиева С.И., Акулова С.С., Бза­рова Т.М., Денисова Р.В., Исаева К.Б., Слепцова Т.В., Митенко Е.В., Чистякова Е.Г., Фетисова А.Н., Семикина Е.Л. Эффективность и безопасность длительного применения ритуксимаба у пациентов с системным ювенильным идио­патическим артритом. Вопросы современной педиатрии 2013; 12(2): 89–100.
3. Yokota S., Imagawa T., Miyamae T. Safety and efficacy of up to three years of continuous tocilizumab therapy in children with systemic-onset juvenile idiopathic arthritis [SAT0536]. Ann Rheum Dis 2009; 68(Suppl. 3): 715.
4. Smitten A.L., Choi H.K., Hochberg M.C., Suissa S., Simon T.A., Testa M.A., Chan K.A. The risk of hospitalized infection in patients with rheumatoid arthritis. J Rheumatol 2008; 35(3): 387–393.
5. Doran M.F., Crowson C.S., Pond G.R., O’Fallon W.M., Gabriel S.E. Frequency of infection in patients with rheumatoid arthritis compared with controls: a population-based study. Arthritis Rheum 2002; 46(9): 2287–2293, http://dx.doi.org/10.1002/art.10524.
6. Au K., Reed G., Curtis J.R., Kremer J.M., Greenberg J.D., Strand V., Furst D.E.; CORRONA Investigators. High disease activity is associated with an increased risk of infection in patients with rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 2011; 70(5): 785–791, http://dx.doi.org/10.1136/ard.2010.128637.
7. Doran M.F., Crowson C.S., Pond G.R., O’Fallon W.M., Gabriel S.E. Predictors of infection in rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum 2002; 46(9): 2294–2300, http://dx.doi.org/10.1002/art.10529.
8. Beukelman T., Xie F., Chen L., Baddley J.W., Delzell E., Grijalva C.G., Lewis J.D., Ouellet-Hellstrom R., Patkar N.M., Saag K.G., Winthrop K.L., Curtis J.R.; SABER Collaboration. Rates of hospitalized bacterial infection associated with juvenile idiopathic arthritis and its treatment. Arthritis Rheum 2012; 64(8): 2773–2780, http://dx.doi.org/10.1002/art.34458.
9. Бзарова Т.М., Алексеева Е.И., Валиева С.И., Алек­сеева А.М., Денисова Р.В., Исаева К.Б., Чистякова Е.Г., Ли­си­цын А.О. Безопасность применения ингибиторов фактора некроза опухоли во взрослой и детской рев­матологической практике. Вопросы современной педиат­рии 2010; 9(1): 82–94.
10. Halbig M., Horneff G. Improvement of functional ability in children with juvenile idiopathic arthritis by treatment with etanercept. Rheumatol Int 2009; 30(2): 229–238, http://dx.doi.org/10.1007/s00296-009-0942-3.
11. Алексеева Е.И., Бзарова Т.М. Алгоритм диагностики и лечения ювенильного артрита. Вопросы современной педиатрии 2010; 9(6): 78–104.
12. Wallace C.A., Giannini E.H., Huang B., Itert L., Ruperto N.; Childhood Arthritis Rheumatology Research Alliance; Pediatric Rheumatology Collaborative Study Group; Paediatric Rheumatology International Trials Organisation. American College of Rheumatology provisional criteria for defining clinical inactive disease in select categories of juvenile idiopathic arthritis. Arthritis Care Res 2011; 63(7): 929–936, http://dx.doi.org/10.1002/acr.20497.
13. Хаитов Р.М., Ярилин А.А., Пинегин Б.В. Иммуно­ло­гия: атлас. М; 2011.
14. Pileggi G.S., de Souza C.B., Ferriani V.P. Safety and immunogenicity of varicella vaccine in patients with juvenile rheumatic diseases receiving methotrexate and corticosteroids. Arthritis Care Res 2010; 62(7): 1034–1039, http://dx.doi.org/10.1002/acr.20183.
15. Dell’ Era L., Esposito S., Corona F., Principi N. Vaccination of children and adolescents with rheumatic diseases. Rheumatology 2011; 50(8): 1358–1365, http://dx.doi.org/10.1093/rheumatology/ker102.
16. Koshcheeva Iu.V., Kharit S.M., Kalinina N.M. Specific features of diphtheria vaccinal process in children with rheumatic diseases. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol 2001; 6: 44–49.
17. Kostinov M.P., Tarasova A.A., Zaitsev E.M. Contents of antibodies to Bordetella pertussis antigens in patients with rheumatic diseases. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol 2007; 6: 61–64.
18. Kasapçopur O., Cullu F., Kamburoğlu-Goksel A., Cam H., Akdenizli E., Calýkan S., Sever L., Arýsoy N. Hepatitis B vaccination in children with juvenile idiopathic arthritis. Ann Rheum Dis 2004; 63(9): 1128–1130.
19. Kanakoudi-Tsakalidou F., Trachana M., Pratsidou-Gertsi P., Tsitsami E., Kyriazopoulou-Dalaina V. Influenza vaccination in children with chronic rheumatic diseases and long-term immunosuppressive therapy. Clin Exp Rheumatol 2001; 19(5): 589–594.
20. Elkayam O., Caspi D., Reitblatt T., Charboneau D., Rubins J.B. The effect of tumor necrosis factor blockade on the response to pneumococcal vaccination in patients with rheumatoid arthritis and ankylosing spondylitis. Semin Arthritis Rheum 2004; 33(4): 283–288, http://dx.doi.org/10.1053/j.semarthrit.2003.10.003.

Zakirov R.S., Akulova S.S., Filyanskaya E.G., Semikina E.L., Mayanskiy N.A. In vitro Cytokine Synthesis by Lymphocytes in Children in Juvenile Idiopathic Arthritis Remission Against the Background of Genetically Engineered Biologic Drug Therapy. Sovremennye tehnologii v medicine 2016; 8(2): 46, https://doi.org/10.17691/stm2016.8.2.06